物 料 號(hào)：28477-00書 名：基因工程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(第2版)作 者：朱旭芬 ISBN：978-7-04-028477-5版 別：教學(xué)用書出版日期：2010-4-1定 價(jià)：￥29元獲獎(jiǎng)信息： 改版信息：新版，替代18364 【內(nèi)容簡(jiǎn)介】 為了適應(yīng)學(xué)科的發(fā)展與實(shí)際需要，本實(shí)驗(yàn)教材在第1版的基礎(chǔ)上進(jìn)行了修改和補(bǔ)充，擴(kuò)展了部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，增加了一些最新進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，由原來的35個(gè)實(shí)驗(yàn)增加為49個(gè)實(shí)驗(yàn)，使其在內(nèi)容上更加豐富和完善。第2版的編寫除了繼續(xù)保持第1版的寫作特點(diǎn)和基本要求外，著重?cái)U(kuò)充了基因的克隆、鑒定方法以及蛋白質(zhì)化學(xué)分析的一些新技術(shù)和新發(fā)展，此外還添加了部分真核生物酵母的實(shí)驗(yàn)。書中選用了一批新的插圖、照片，以使教材內(nèi)容形象、直觀，可讀性強(qiáng)。本教材中所有實(shí)驗(yàn)比較系統(tǒng)地介紹了與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容相關(guān)的基本原理，強(qiáng)調(diào)指出了實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)，并對(duì)與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的內(nèi)容進(jìn)行評(píng)議，以利于讀者更好地理解實(shí)驗(yàn)，起到實(shí)驗(yàn)指南的作用。書末附錄部分還包含了試劑的配制等內(nèi)容，方便讀者參考。本教材可作為本科生或者研究生的基因工程實(shí)驗(yàn)教學(xué)的參考書?！灸夸浶畔ⅰ?實(shí)驗(yàn)計(jì)劃表導(dǎo)論1基因文庫的構(gòu)建1-1染[]色[]體DNA的提取1-2總RNA和mRNA的提取1-3L噬菌體DNA的提取1-4染[]色[]體DNA的部分消化1-5基因組文庫的構(gòu)建1-6cDNA合成1-7cDNA文庫的構(gòu)建2目的基因的獲得2-1PCR擴(kuò)增2-2核酸電泳2-3目的基因片段的獲得2-4核酸探針的標(biāo)記及檢測(cè)2-5核酸探針篩選基因文庫2-6反轉(zhuǎn)錄PCR2-7RACEPCR2-8反向PCR2-9Sitefinding-PCR.3載體質(zhì)粒的制備3-1質(zhì)粒DNA的提取與純化3-2核酸純度、濃度與相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定4擴(kuò)增質(zhì)粒的構(gòu)建4-1限制性內(nèi)切酶的酶切反應(yīng)4-2凝膠電泳法進(jìn)行DNA的分離與純化4-3DNA片段的體外連接4-4T-A克隆5重組IDNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞5-1感受態(tài)細(xì)胞的制備5-2重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化5-3外源基因在畢赤酵母中的轉(zhuǎn)化與整合6．重組子的篩選與鑒定6-1陽性克隆的篩選6-2DNA序列測(cè)定6-3序列同源性分析6-4DNA印跡6-5菌落原位雜交6-6熒光原位雜交7表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與誘導(dǎo)表達(dá)7-1表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化7-2RNA印跡7-3外源基因的誘導(dǎo)表達(dá)7-4蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定7-5SDS-PAGE7-6蛋白質(zhì)印跡8蛋白質(zhì)樣品的分析8-1等電聚焦電泳8-2雙向電泳8-3非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳8-4酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)8-5蛋白質(zhì)生物功能測(cè)定8-6酶活性的測(cè)定9工程菌的培養(yǎng)與目的產(chǎn)物分離9-1發(fā)酵條件的優(yōu)化9-2包含體的復(fù)性9-3誘導(dǎo)表達(dá)蛋白質(zhì)的分離沉淀9-4凝膠過濾層析9-5離子交換層析9-6親和層析附錄1簡(jiǎn)寫附錄2實(shí)驗(yàn)注窟事項(xiàng)附錄3如何撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告附錄4常用堿基、氨基酸符號(hào)及緩沖液附錄5大腸桿菌基因